AbstraktEksperimentet ble utført for å studere effekten av diludin på verpeytelse og eggkvalitet hos høner og tilnærming til mekanismen for effektene ved å bestemme indekser for egg- og serumparametre. 1024 ROM-høner ble delt inn i fire grupper som hver inkluderte fire replikater på 64 høner hver, Behandlingsgruppene fikk samme basaldiett supplert med henholdsvis 0, 100, 150, 200 mg/kg diludin i 80 dager.Resultatene var som følger.Tilsetning av diludin til dietten forbedret verpeevnen for høner, hvorav 150 mg/kg behandling var best;legningshastigheten ble økt med 11,8 % (p< 0,01), eggmasseomdannelsen ble redusert med 10,36 % (p< 0 01).Eggvektene ble økt med økningen av tilsatt diludin.Diludin reduserte serumkonsentrasjonen av urinsyre signifikant (p<0,01);tilsetning av diludin reduserte serum Ca2+og innhold av uorganisk fosfat, og økt aktivitet av alkin fosfatase (ALP) i serum (p<0,05), så det hadde signifikante effekter på å redusere eggbrudd (p<0,05) og abnormitet (p < 0,05);diludin økte albuminhøyden betydelig.Haugh-verdi (p <0,01), skalltykkelse og skallvekt (p< 0,05), 150 og 200mg/kg diludin reduserte også totalkolesterol i eggeplomme (p<0 05), men økte eggeplommevekt (p < 0,05).I tillegg kunne diludin øke aktiviteten til lipase (p < 0,01), og redusere innholdet av triglyserid (TG3) (p<0,01) og kolesterol (CHL) (p< 0 01) i serum, det reduserte prosentandelen av abdominal fett (p< 0,01) og leverfettinnhold (p< 0,01), hadde evne til å hindre høner fra fettlever.Diludin økte signifikant aktiviteten til SOD i serum (p<0 01) når det ble tilsatt diett i mer enn 30 dager.Det ble imidlertid ikke funnet noen signifikant forskjell i aktivitetene til GPT og GOT av serum mellom kontrollgruppen og den behandlede gruppen.Det ble utledet at diludin kunne forhindre cellemembran fra oksidasjon
Stikkorddiludin;høne;SOD;kolesterol;triglyserid, lipase
Diludin er det nye ikke-ernæringsmessige antioksidasjonsvitamintilsetningsstoffet og har effekten[1-3]av å begrense oksidasjon av den biologiske membranen og stabilisere vevet til de biologiske cellene osv. På 1970-tallet fant landbrukseksperten fra Latvia i det tidligere Sovjetunionen at diludin hadde effektene[4]å fremme vekst av fjørfe og motstå frysing og aldring for noen planter.Det ble rapportert at diludin ikke bare kunne fremme vekst av dyr, men forbedre reproduksjonsevnen til dyr åpenbart og forbedre drektighetsraten, produksjonen av melk, produksjonen av egg og klekkehastigheten til hunndyret.[1, 2, 5-7].Studien av diludin i Kina ble startet fra 1980-tallet, og flertallet av studiene om diludin i Kina er så langt begrenset til å bruke effekt, og de få forsøkene på verpefugler ble rapportert.Chen Jufang (1993) rapporterte at diludin kunne forbedre produksjonen av egg og vekten av egget til fjærfeet, men ble ikke dypere[5]studiet av virkningsmekanismen derav.Derfor implementerte vi den systematiske studien av effekten og mekanismen ved å mate verpehønsene med dietten dopet med diludin, og en del av resultatet nå er rapportert som følger:
Tabell 1 Sammensetning og næringskomponenter av eksperimentdiett
%
-------------------------------------------------- --------------------------------------------
Sammensetning av kosthold Næringskomponenter
-------------------------------------------------- --------------------------------------------
Mais 62 ME③ 11,97
Bønnemasse 20 CP 17,8
Fiskemel 3 Ca 3,42
Rapsmel 5 P 0,75
Benmel 2 M et 0,43
Steinmel 7,5 M et Cys 0,75
Metionin 0,1
Salt 0,3
Multivitamin① 10
Sporelementer② 0.1
-------------------------------------------------- ------------------------------------------
① Multivitamin: 11 mg riboflavin, 26 mg folsyre, 44 mg oryzanin, 66 mg niacin, 0,22 mg biotin, 66 mg B6, 17,6 mg B12, 880 mg kolin, 6g VU 3,6 g VU 3,6 mgE, 6600ICU av VDog 20000 ICU av VA, legges til hvert kilo av dietten;og 10 g multivitamin legges til hver 50 kg diett.
② Sporelementer (mg/kg): 60 mg Mn, 60 mg Zn, 80 mg Fe, 10 mg Cu, 0,35 mg I og 0,3 mg Se tilsettes hvert kilogram av dietten.
③ Enheten for metaboliserbar energi refererer til MJ/kg.
1. Materialer og metode
1.1 Testmateriale
Beijing Sunpu Biochem.& Tech.Co., Ltd. bør tilby diludin;og forsøksdyret skal referere til romerske kommersielle verpehøner som er 300 dager gamle.
Eksperimentdiett: Testeksperimentdietten bør tilberedes i henhold til den faktiske tilstanden under produksjonen på grunnlag av NRC-standarden, som vist i tabell 1.
1.2 Testmetode
1.2.1 Fôringseksperiment: Fôringseksperimentet bør implementeres på gården til Hongji Company i Jiande City;1024 romerske verpehøner bør velges og deles inn i fire grupper tilfeldig og hver for 256 stykker (hver gruppe skal gjentas fire ganger, og hver høne skal gjentas 64 ganger);hønene bør fôres med de fire diettene med forskjellig innhold av diludin, og 0, 100, 150, 200 mg/kg av fôret bør tilsettes for hver gruppe.Testen ble startet 10. april 1997;og hønene kunne finne mat og ta vann fritt.Maten tatt av hver gruppe, leggingshastigheten, produksjonen av egg, det knuste egget og antall unormale egg skal registreres.Dessuten ble testen avsluttet 30. juni 1997.
1.2.2 Måling av eggkvalitet: 20 egg bør tas tilfeldig når testen ble implementert fire 40 dager for å måle indikatorene relatert til eggkvaliteten, som eggformindeks, haugenhet, relativ vekt av skallet, skalltykkelsen, eggeplommens indeks, den relative vekten av eggeplommen osv. Dessuten bør innholdet av kolesterol i eggeplommen måles ved å bruke COD-PAP-metoden i nærvær av Cicheng-reagens produsert av Ningbo Cixi Biochemical Test Plant.
1.2.3 Måling av serum biokjemisk indeks: 16 testhøner bør tas fra hver gruppe hver gang når testen ble gjennomført i 30 dager og når testen avsluttes for å forberede serumet etter prøvetaking av blodet fra venen på vingen.Serumet bør oppbevares ved lav temperatur (-20 ℃) for å måle relevante biokjemiske indekser.Den abdominale fettprosenten og leverens lipidinnhold bør måles etter slakting og uttak av bukfettet og leveren etter fullført blodprøvetaking.
Superoksiddismutase (SOD) bør måles ved å bruke metningsmetoden i nærvær av reagenssettet produsert av Beijing Huaqing Biochem.& Tech.Forskningsinstitutt.Urinsyren (UN) i serumet bør måles ved å bruke U ricase-PAP-metoden i nærvær av Cicheng-reagenssettet;triglyserid (TG3) bør måles ved å bruke GPO-PAP ett-trinns metode i nærvær av Cicheng-reagenssettet;lipasen bør måles ved å bruke nefelometri i nærvær av Cicheng-reagenssettet;total serumkolesterol (CHL) bør måles ved å bruke COD-PAP-metoden i nærvær av Cicheng-reagenssettet;glutaminsyre-pyrodruesyretransaminasen (GPT) bør måles ved å bruke kolorimetri i nærvær av Cicheng-reagenssettet;glutamin-oksaleddiksyretransaminasen (GOT) bør måles ved å bruke kolorimetri i nærvær av Cicheng-reagenssettet;alkalisk fosfatase (ALP) bør måles ved å bruke hastighetsmetoden i nærvær av Cicheng-reagenssettet;kalsiumionet (Ca2+) i serum bør måles ved å bruke methylthymol blue complexone-metoden i nærvær av Cicheng-reagenssettet;det uorganiske fosforet (P) bør måles ved å bruke molybdatblått-metoden i nærvær av Cicheng-reagenssettet.
2 Testresultat
2.1 Effekt på leggeytelse
Leggingsytelsene til forskjellige grupper behandlet ved bruk av diludin er vist i tabell 2.
Tabell 2 Ytelse for høner fôret med basal diett supplert med fire nivåer av diludin
| Mengde diludin som skal tilsettes (mg/kg) | ||||
| 0 | 100 | 150 | 200 | |
| Fôropptak (g) |  | |||
| Leggingsrate (%) | ||||
| Gjennomsnittlig vekt av egg (g) | ||||
| Forholdet mellom materiale og egg | ||||
| rate av ødelagte egg (%) | ||||
| Frekvens av unormale egg (%) | ||||
Fra tabell 2 er leggingshastighetene for alle grupper behandlet ved bruk av diludin åpenbart forbedret, hvor effekten ved behandling ved bruk av 150 mg/kg er optimal (opptil 83,36%), og 11,03% (p<0,01) er forbedret sammenlignet med med referansegruppen;diludin har derfor effekten av å forbedre utleggingshastigheten.Sett fra eggets gjennomsnittlige vekt øker vekten av egget (p>0,05) sammen med økende diludin i det daglige kostholdet.Sammenlignet med referansegruppen er forskjellen mellom alle bearbeidede deler av gruppene behandlet ved å bruke 200 mg/kg diludin ikke åpenbar når 1,79 g fôrinntak legges til gjennomsnittlig;forskjellen blir imidlertid tydeligere gradvis sammen med økende diludin, og forskjellen i forholdet mellom materialet og egget blant de behandlede delene er åpenbar (p<0,05), og effekten er optimal når 150 mg/kg diludin og er 1,25:1 som er redusert for 10,36 % (p<0,01) sammenlignet med referansegruppen.Sett fra brutt egg-rate av alle deler som er behandlet, kan brutt egg-rate (p<0,05) reduseres når diludin tilsettes til det daglige kostholdet;og prosentandelen av unormale egg reduseres (p<0,05) sammen med økende diludin.
2.2 Effekt på eggkvalitet
Sett fra tabell 3, påvirkes ikke eggformindeksen og eggets egenvekt (p>0,05) når diludin tilsettes den daglige dietten, og vekten av skallet økes med økende diludin tilsatt daglig diett, hvor vektene av skjellene økes med henholdsvis 10,58 % og 10,85 % (p<0,05) sammenlignet med referansegruppene når 150 og 200 mg/kg diludin tilsettes;tykkelsen på eggeskallet økes med økende diludin i det daglige kostholdet, hvor tykkelsen på eggeskallet økes med 13,89 % (p<0,05) når 100 mg/kg diludin tilsettes sammenlignet med referansegruppene, og tykkelsene av eggeskallene økes med henholdsvis 19,44 % (p<0,01) og 27,7 % (p<0,01) når 150 og 200 mg/kg tilsettes.Haugh-enheten (p<0,01) forbedres åpenbart når diludinet tilsettes, noe som indikerer at diludinet fremmer syntesen av tykt albumin av eggehvite.Diludinet har som funksjon å forbedre indeksen til eggeplomme, men forskjellen er ikke åpenbar (p<0,05).Innholdet av kolesterol i eggeplomme av alle grupper er forskjellig og kan åpenbart reduseres (p<0,05) etter tilsetning av 150 og 200 mg/kg diludin.De relative vektene til eggeplommen er forskjellig fra hverandre på grunn av forskjellige mengder tilsatt diludin, der den relative vekten til eggeplommen er forbedret med 18,01 % og 14,92 % (p<0,05) når 150 mg/kg og 200 mg/kg sammenlignes med referansegruppen;derfor har passende diludin effekten av å fremme syntese av eggeplomme.
Tabell 3 Effekter av diludin på eggkvalitet
| Mengde diludin som skal tilsettes (mg/kg) | ||||
| Eggkvalitet | 0 | 100 | 150 | 200 |
| Eggformindeks (%) |  | |||
| Egenvekt for egg (g/cm3) | ||||
| Relativ vekt av eggeskall (%) | ||||
| Tykkelse av eggeskall (mm) | ||||
| Haugh-enhet (U) | ||||
| Eggeplommeindeks (%) | ||||
| Kolesterol av eggeplomme (%) | ||||
| Relativ vekt av eggeplomme (%) | ||||
2.3 Effekter på bukfettprosent og innhold av leverfett hos verpehønene
Se figur 1 og figur 2 for effekter av diludin til bukfettprosent og innhold av leverfett hos verpehønene
Figur 1 Effekt av diludin på prosentandel av bukfett (PAF) hos verpehøner
| Prosentandel av abdominal fett | |
| Mengde diludin som skal tilsettes |
Figur 2 Effekt av diludin på leverfettinnhold (LF) hos verpehøner
| Fettinnhold i leveren | |
| Mengde diludin som skal tilsettes |
Sett fra figur 1 reduseres prosentene av bukfett i testgruppen med henholdsvis 8,3 % og 12,11 % (p<0,05) når 100 og 150 mg/kg diludin sammenlignet med referansegruppen, og prosentandelen bukfett reduseres. for 33,49 % (p<0,01) når 200 mg/kg diludin tilsettes.Sett fra figur 2 er leverfettinnholdet (absolutt tørt) behandlet med henholdsvis 100, 150, 200 mg/kg diludin redusert med 15,00 % (p<0,05), 15,62 % (p<0,05) og 27,7 % (p< 0,01) henholdsvis sammenlignet med referansegruppen;diludin har derfor effekten av å redusere prosentandelen av abdominal fett og leverfettinnholdet i legningsinnholdet åpenbart, hvor effekten er optimal når 200 mg/kg diludin tilsettes.
2.4 Effekt på serum biokjemisk indeks
Sett fra tabell 4 er forskjellen mellom delene behandlet under fase I (30d) av SOD-testen ikke åpenbar, og de biokjemiske serumindeksene for alle gruppene som diludin er tilsatt i fase II (80d) av testen er høyere enn referansegruppen (p<0,05).Urinsyren (p<0,05) i serumet kan reduseres når 150mg/kg og 200mg/kg diludin tilsettes;mens effekten (p<0,05) er tilgjengelig når 100mg/kg diludin tilsettes i fase I. Diludinet kan redusere triglyseridet i serumet, hvor effekten er optimal (p<0,01) i gruppen når 150mg/kg av diludin tilsettes i fase I, og er optimal i gruppen når 200mg/kg diludin tilsettes i fase II.Totalkolesterolet i serumet reduseres med økende diludin tilsatt daglig diett, nærmere bestemt reduseres innholdet av totalkolesterol i serumet med henholdsvis 36,36 % (p<0,01) og 40,74 % (p<0,01) ved 150mg/kg og 200 mg/kg diludin tilsettes i fase I sammenlignet med referansegruppen, og reduseres med henholdsvis 26,60 % (p<0,01), 37,40 % (p<0,01) og 46,66 % (p<0,01) når 100 mg/kg, 150 mg /kg og 200mg/kg diludin tilsettes i fase II sammenlignet med referansegruppen.Dessuten økes ALP ved økende diludin tilsatt daglig kost, mens verdiene av ALP i gruppen som tilsettes 150mg/kg og 200mg/kg diludin åpenbart er høyere enn referansegruppen (p<0,05).
Tabell 4 Effekter av diludin på serumparametere
| Mengde diludin som skal tilsettes (mg/kg) i fase I (30d) av testen | ||||
| Punkt | 0 | 100 | 150 | 200 |
| Superoksiddismutase (mg/ml) |  | |||
| Urinsyre | ||||
| Triglyserid (mmol/L) | ||||
| Lipase (U/L) | ||||
| Kolesterol (mg/dL) | ||||
| Glutaminsyre-pyrodruesyre transaminase (U/L) | ||||
| Glutamin-oksaleddiksyretransaminase (U/L) | ||||
| Alkalisk fosfatase (mmol/L) | ||||
| Kalsiumion (mmol/L) | ||||
| Uorganisk fosfor (mg/dL) | ||||
| Mengde diludin som skal tilsettes (mg/kg) i fase II (80d) av testen | ||||
| Punkt | 0 | 100 | 150 | 200 |
| Superoksiddismutase (mg/ml) |  | |||
| Urinsyre | ||||
| Triglyserid (mmol/L) | ||||
| Lipase (U/L) | ||||
| Kolesterol (mg/dL) | ||||
| Glutaminsyre-pyrodruesyre transaminase (U/L) | ||||
| Glutamin-oksaleddiksyretransaminase (U/L) | ||||
| Alkalisk fosfatase (mmol/L) | ||||
| Kalsiumion (mmol/L) | ||||
| Uorganisk fosfor (mg/dL) | ||||
3 Analyse og diskusjon
3.1 Diludinet i testen forbedret leggingshastigheten, vekten av egget, Haugh-enheten og den relative vekten av eggeplommen, noe som indikerte at diludinet hadde effekten av å fremme assimilering av proteinet og forbedre mengden syntese av tykk. albumin av eggehvite og protein av eggeplomme.Videre ble innholdet av urinsyre i serumet åpenbart redusert;og det ble generelt anerkjent at reduksjonen av innhold av ikke-proteinnitrogen i serumet medførte at katabolismehastigheten til proteinet ble redusert, og retensjonstiden for nitrogen ble utsatt.Dette resultatet ga grunnlaget for å øke proteinretensjonen, fremme legging av egg og forbedre vekten av egget til verpehønene.Resultatet av testen påpekte at leggeeffekten er optimal når 150 mg/kg diludin ble tilsatt, noe som i det vesentlige stemte overens med resultatet[6,7]av Bao Erqing og Qin Shangzhi og ervervet ved å tilsette diludin i den sene perioden med verpehøner.Effekten ble redusert når mengden diludin oversteg 150 mg/kg, noe som kan skyldes at proteintransformasjonen[8]ble påvirket på grunn av overdreven dosering og overdreven belastning av metabolisme av organet til diludin.
3.2 Konsentrasjonen av Ca2+i serumet til det leggende egget ble redusert, P i serumet ble redusert i begynnelsen og ALP-aktiviteten økte åpenbart i nærvær av diludin, noe som tydet på at diludin tydeligvis påvirket metabolismen av Ca og P.Yue Wenbin rapporterte at diludin kunne fremme absorpsjon[9] av mineralelementer Fe og Zn;ALP eksisterte hovedsakelig i vev, slik som lever, bein, tarmkanalen, nyrene, etc.;ALP i serumet var hovedsakelig fra leveren og beinet;ALP i beinet fantes hovedsakelig i osteoblasten og kunne kombinere fosfationet med Ca2 fra serumet etter transformasjon ved å fremme nedbrytning av fosfat og øke konsentrasjonen av fosfationet, og ble avsatt på beinet i form av hydroksyapatitt, etc. for å føre til reduksjon av Ca og P i serumet, noe som stemmer overens med økning av eggeskalltykkelse og relativ vekt av eggeskall i eggkvalitetsindikatorene.Dessuten ble andelen knust egg og prosentandelen av det unormale egget åpenbart redusert med tanke på verpeytelsen, noe som også forklarte dette punktet.
3.3 Den abdominale fettavsetningen og leverfettinnholdet til verpehønene ble åpenbart redusert ved å tilsette diludin til dietten, noe som indikerte at diludinet hadde en effekt på å begrense syntesen av fett i kroppen.Videre kan diludin forbedre aktiviteten til lipasen i serumet i det tidlige stadiet;aktiviteten til lipase var åpenbart økt i gruppen som ble tilsatt 100 mg/kg diludin, og innholdet av triglyserid og kolesterol i serumet ble redusert (p<0,01), noe som indikerte at diludin kunne fremme nedbrytning av triglyserid. og begrense syntese av kolesterol.Fettavsetningen kan begrenses fordi enzymet av lipidmetabolisme i leveren[10,11], og reduksjon av kolesterol i eggeplommen forklarte også dette punktet [13].Chen Jufang rapporterte at diludin kunne begrense dannelsen av fett i dyret og forbedre andelen magert kjøtt hos slaktekyllingen og grisen, og hadde effekten av å behandle fettlever.Resultatet av testen tydeliggjorde denne virkningsmekanismen, og disseksjons- og observasjonsresultatene til testhønene viste også at diludinet klart kunne redusere forekomsten av fettlever hos verpehønene.
3.4 GPT og GOT er to viktige indikatorer som gjenspeiler funksjonene til leveren og hjertet, og leveren og hjertet kan bli skadet hvis aktivitetene er for høye.Aktivitetene til GPT og GOT i serumet ble ikke åpenbart endret når diludin ble tilsatt i testen, noe som indikerte at leveren og hjertet ikke var skadet;videre viste måleresultatet av SOD at aktiviteten til SOD i serumet åpenbart kunne forbedres når diludin ble brukt i en viss tid.SOD refererer til hovedoppfangeren av superoksyd frie radikaler i kroppen;det er av betydning for å opprettholde integriteten til den biologiske membranen, forbedre organismens immunitetsevne og opprettholde helsen til dyret når innholdet av SOD i kroppen økes.Quh Hai, etc. rapporterte at diludin kunne forbedre aktiviteten til 6-glukosefosfatdehydrogenase i den biologiske membranen og stabilisere vevet [2] i den biologiske cellen.Sniedze påpekte at diludin begrenset aktiviteten [4] til NADPH cytokrom C-reduktase åpenbart etter å ha studert forholdet mellom diludin og relevant enzym i NADPH-spesifikk elektronoverføringskjede i rottelevermikrosom.Odydents påpekte også at diludin var relatert [4] til det sammensatte oksidasesystemet og det mikrosomale enzymet relatert til NADPH;og virkningsmekanismen til diludin etter inntreden i dyret er å spille en rolle i å motstå oksidasjon og beskytte den biologiske membranen [8] ved å avskjære aktiviteten til elektronoverførings-NADPH-enzymet til mikrosomet og begrense peroksidasjonsprosessen til lipidforbindelsen.Testresultatet viste at beskyttelsesfunksjonen til diludin til den biologiske membranen fra endringene i SOD-aktivitet til endringer i aktivitetene til GPT og GOT og beviste studieresultatene til Sniedze og Odydents.
Henvisning
1 Zhou Kai, Zhou Mingjie, Qin Zhongzhi, etc. Studie på diludin for å forbedre reproduksjonsevnen til sauerJ. Gress ogLivestock 1994 (2): 16-17
2 Qu Hai, Lv Ye, Wang Baosheng, Effekten av diludin lagt til daglig diett for graviditetsraten og sædkvaliteten til kjøttkanin.J. Chinese Journal of Rabbit Farming1994(6): 6-7
3 Chen Jufang, Yin Yuejin, Liu Wanhan, etc. Test av utvidet påføring av diludin som fôrtilsetningFôrforskning1993 (3): 2-4
4 Zheng Xiaozhong, Li Kelu, Yue Wenbin, etc. Diskusjon om påføringseffekt og virkningsmekanisme for diludin som fjærfevekstfremmerFôrforskning1995 (7): 12-13
5 Chen Jufang, Yin Yuejin, Liu Wanhan, etc. Test av utvidet påføring av diludin som fôrtilsetningFôrforskning1993 (3): 2-5
6 Bao Erqing, Gao Baohua, Test av diludin for fôring av rasen Peking andFôrforskning1992 (7): 7-8
7 Qin Shangzhi Test for å forbedre produktiviteten til rasekjøtthøner i sen verpeperiode ved å bruke diludinGuangxi Journal of Animal Husbandry & Veterinary Medicine1993.9(2): 26-27
8 Dibner J Jl Lvey FJ Leverprotein- og aminosyremetabolisme hos fjærfe Fjærkre Sci1990.69(7): 1188- 1194
9 Yue Wenbin, Zhang Jianhong, Zhao Peie, etc. Studie av tilsetning av diludin og Fe-Zn-preparat til daglig diett til verpehønerFôr og husdyr1997, 18(7): 29-30
10 Mildner A na M, Steven D Clarke Porcin fettsyresyntasekloning av et komplementært DNA, vevsfordeling av itsmRNA og undertrykkelse av ekspresjon av somatotropin og diettprotein J Nutri 1991, 121 900
11 W alzon RL Smon C, M orishita T, et a I Fettlever hemorragisk syndrom hos høner som har overfôret en renset diett Utvalgte enzymaktiviteter og leverhistologi i forhold til leverære og reproduktiv ytelseFjærfe Sci,1993 72(8): 1479-1491
12 Donaldson WE Lipidmetabolisme i leveren til kyllinger respons på fôringFjærkre Sci.1990, 69(7): 1183-1187
13 Ksiazk ieu icz J. K ontecka H, H ogcw sk i L Et notat om kolesterol i blodet som en indikator på kroppsfett hos enderJournal of Aninal and Feed Science,1992, 1(3/4): 289-294
Innleggstid: Jun-07-2021