АпстрактанЕксперимент је спроведен ради проучавања ефеката дилудина на носивост и квалитет јаја код кокошака и приступ механизму ефеката одређивањем индекса параметара јаја и серума. 1024 РОМ кокоши су подељене у четири групе од којих је свака укључивала четири реплика од 64 кокошке свака. Групе за третман су добијале исту базалну исхрану са додатком 0, 100, 150, 200 мг/кг дилудина током 80 дана.Резултати су били следећи.Додавање дилудина исхрани побољшало је перформансе кокошака носиља, од којих је третман са 150 мг/кг био најбољи;његова стопа полагања повећана је за 11,8% (п<0,01), конверзија масе јаја смањена је за 10,36% (п<0,01).Тежина јаја је повећана са повећањем додавања дилудина.Дилудин је значајно смањио концентрацију мокраћне киселине у серуму (п<0,01);додавање дилудина значајно је смањило серумски Ца²⁺и садржај неорганских фосфата, и повећана активност алкин фосфатазе (АЛП) серума (п<0,05), па је значајно утицала на смањење ломљења јаја (п<0,05) и абнормалности (п<0,05);дилудин је значајно повећао висину беланчевина.Хаугх вредност (п <0,01), дебљина љуске и тежина љуске (п<0,05), 150 и 200 мг/кг дилудина су такође смањиле укупни холестерол у жуманцету (п<0,05), али су повећале тежину жуманца (п < 0,05).Поред тога, дилудин би могао да појача активност липазе (п < 0,01) и да смањи садржај триглицерида (ТГ3) (п<0,01) и холестерола (ЦХЛ) (п< 0 01) у серуму, смањио је проценат абдоминалне масти (п<0,01) и садржај масти у јетри (п<0,01), имали су способност да спрече кокошке од масне јетре.Дилудин је значајно повећао активност СОД у серуму (п<0 01) када је додат исхрани дуже од 30 дана.Међутим, није нађена значајна разлика у активностима ГПТ и ГОТ серума између контролне и третиране групе.Закључено је да дилудин може да спречи оксидацију мембране ћелија

Кључне речиДилудине;кокошка;СОД;холестерол;триглицериди, липаза

 

Дилудин је нови ненутритивни антиоксидацијски витамински адитив и има ефекте^[1-3]обуздавања оксидације биолошке мембране и стабилизације ткива биолошких ћелија, итд. Седамдесетих година прошлог века, пољопривредни стручњак Летоније у бившем Совјетском Савезу открио је да дилудин има ефекте^[4]за подстицање раста живине и отпорност на смрзавање и старење неких биљака.Пријављено је да дилудин не само да може подстаћи раст животиње, већ очигледно побољшати репродуктивни учинак животиње и побољшати стопу трудноће, производњу млека, производњу јаја и стопу излегања женке.^{[1, 2, 5-7]}.Проучавање дилудина у Кини започето је 1980-их, а већина студија о дилудину у Кини је ограничена на коришћење ефекта до сада, а пријављено је неколико испитивања на птицама несилицама.Цхен Јуфанг (1993) је известио да би дилудин могао побољшати излаз јаја и тежину јајета живине, али није продубио^[5]проучавање механизма његовог деловања.Стога смо спровели систематско проучавање ефекта и његовог механизма тако што смо кокошке носиље хранили храном допираном дилудином, а један део резултата сада се приказује на следећи начин:

Табела 1. Састав и хранљиве компоненте експерименталне дијете

%

-------------------------------------------------- --------------------------------------------

Састав дијететске компоненте Нутриент

-------------------------------------------------- --------------------------------------------

Кукуруз 62 МЕ③ 11.97

Пулпа пасуља 20 ЦП 17.8

Рибље брашно 3 Ца 3,42

Сачма од уљане репице 5 П 0,75

Коштано брашно 2 М ет 0,43

Камено брашно 7,5 М ет Цис 0,75

Метионин 0.1

Сол 0,3

Мултивитамин① 10

Елементи у траговима② 0.1

-------------------------------------------------- -----------------------------------------

① Мултивитамин: 11мг рибофлавина, 26мг фолне киселине, 44мг оризанина, 66мг ниацина, 0,22мг биотина, 66мг Б6, 17,6мг Б12, 880мг холина, ВКИ66, 30мг_E, 6600ИЦУ од В_Dи 20000 ИЦУ од В_A, додају се сваком килограму исхране;а на сваких 50 кг исхране додаје се 10 г мултивитамина.

② Елементи у траговима (мг/кг): 60 мг Мн, 60 мг Зн, 80 мг Фе, 10 мг Цу, 0,35 мг И и 0,3 мг Се додају се сваком килограму исхране.

③ Јединица метаболичне енергије се односи на МЈ/кг.

 

1. Материјали и метода

1.1 Материјал за испитивање

Пекинг Сунпу Биоцхем.& Тецх.Цо., Лтд. треба да понуди дилудин;а испитна животиња ће се односити на римске комерцијалне кокошке носиље које су старе 300 дана.

 

Експериментална исхрана: исхрану за тест експеримент треба припремити према стварном стању током производње на основу НРЦ стандарда, као што је приказано у табели 1.

1.2 Метода испитивања

1.2.1 Експеримент храњења: експеримент храњења треба да се спроведе на фарми компаније Хонгји у граду Јианде;1024 римске кокошке носиље треба изабрати и насумично поделити у четири групе и свака по 256 комада (свака група треба да се понови четири пута, а свака кокошка треба да се понови 64 пута);кокошке треба хранити са четири дијете са различитим садржајем дилудина, а за сваку групу треба додати 0, 100, 150, 200 мг/кг хране.Тест је почео 10. априла 1997. године;а кокошке су могле слободно да нађу храну и воду.Треба записати храну коју је свака група узимала, број несности, излаз јаја, разбијено јаје и број абнормалних јаја.Штавише, тест је завршен 30. јуна 1997. године.

1.2.2 Мерење квалитета јаја: 20 јаја треба насумично узети када је тест спроведен четири 40 дана како би се измерили индикатори који се односе на квалитет јајета, као што су индекс облика јајета, јединица хаугха, релативна тежина љуске, дебљина љуске, индекс жуманца, релативна тежина жуманца, итд. Штавише, садржај холестерола у жуманцету треба мерити коришћењем ЦОД-ПАП методе у присуству Цицхенг реагенса који производи Нингбо Цики Биоцхемицал Тест Плант.

1.2.3 Мерење серумског биохемијског индекса: 16 тест кокошака треба узети из сваке групе сваки пут када је тест спроведен 30 дана и када се тест заврши да би се припремио серум након узорковања крви из вене на крилу.Серум треба чувати на ниској температури (-20℃) како би се измерили релевантни биохемијски индекси.Проценат трбушне масти и садржај липида у јетри треба мерити након клања и вађења трбушне масти и јетре по завршетку узимања крви.

Супероксид дисмутазу (СОД) треба мерити коришћењем методе засићења у присуству комплета реагенса који производи Пекинг Хуакинг Биоцхем.& Тецх.Истраживачки институт.Мокраћну киселину (УН) у серуму треба мерити употребом Урицасе-ПАП методе у присуству комплета реагенса Цицхенг;триглицериде (ТГ3) треба мерити коришћењем ГПО-ПАП методе у једном кораку у присуству комплета реагенса Цицхенг;липазу треба мерити коришћењем нефелометрије у присуству комплета реагенса Цицхенг;укупни холестерол у серуму (ЦХЛ) треба мерити коришћењем ЦОД-ПАП методе у присуству комплета реагенса Цицхенг;глутаминско-пирувичну трансаминазу (ГПТ) треба мерити коришћењем колориметрије у присуству комплета реагенса Цицхенг;глутаминско-оксалацетну трансаминазу (ГОТ) треба мерити коришћењем колориметрије у присуству комплета реагенса Цицхенг;алкалну фосфатазу (АЛП) треба мерити коришћењем методе брзине у присуству комплета реагенса Цицхенг;јон калцијума (ца²⁺) у серуму треба мерити коришћењем методе метилтимол плавог комплексона у присуству комплета реагенса Цицхенг;неоргански фосфор (П) треба мерити коришћењем методе молибдат плаве у присуству комплета реагенса Цицхенг.

 

2 Резултат теста

2.1 Утицај на перформансе полагања

Перформансе полагања различитих група обрађених дилудином приказане су у табели 2.

Табела 2 Учинак кокошака храњених основном исхраном са додатком четири нивоа дилудина

 

Количина дилудина за додавање (мг/кг)
	0	100	150	200
Унос хране (г)
Носивост (%)
Просечна тежина јајета (г)
Однос материјала и јајета
Стопа разбијених јаја (%)
Стопа абнормалног јајета (%)

 

Из табеле 2 видљиво је побољшање носивости свих група обрађених дилудином, при чему је ефекат при преради са 150мг/кг оптималан (до 83,36%), а 11,03% (п<0,01) је побољшан у поређењу са са референтном групом;стога дилудин утиче на побољшање стопе полагања.Гледано из просечне тежине јајета, тежина јајета расте (п>0,05) са повећањем дилудина у дневној исхрани.У поређењу са референтном групом, разлика између свих обрађених делова група обрађених употребом 200мг/кг дилудина није очигледна када се у просеку дода 1,79г уноса хране;међутим, разлика постаје очигледнија постепено са повећањем дилудина, а разлика у односу материјала према јајету међу обрађеним деловима је очигледна (п<0,05), а ефекат је оптималан када се 150мг/кг дилудина и 1,25:1 што је смањено за 10,36% (п<0,01) у поређењу са референтном групом.Гледано из стопе разбијених јаја свих обрађених делова, стопа разбијених јаја (п<0,05) може се смањити када се дилудин дода у дневну исхрану;а проценат абнормалних јаја се смањује (п<0,05) уз повећање дилудина.

 

2.2 Утицај на квалитет јаја

Гледано из табеле 3, индекс облика јајета и специфична тежина јајета не утичу (п>0,05) када се дилудин дода свакодневној исхрани, а тежина љуске се повећава са повећањем дилудина који се додаје дневној исхрани, при чему су тежине шкољки повећане за 10,58% и 10,85% (п<0,05) респективно у поређењу са референтним групама када се додају 150 и 200 мг/кг дилудина;дебљина љуске јајета се повећава са повећањем дилудина у дневној исхрани, при чему се дебљина љуске јајета повећава за 13,89% (п<0,05) када се дода 100мг/кг дилудина у поређењу са референтним групама, а дебљине љуске јајета се повећавају за 19,44% (п<0,01) и 27,7% (п<0,01) када се додају 150 и 200 мг/кг.Хаугхова јединица (п<0,01) је очигледно побољшана када се дода дилудин, што указује да дилудин има ефекат подстицања синтезе густог беланчевина беланцета.Дилудин има функцију побољшања индекса жуманца, али разлика није очигледна (п<0,05).Садржај холестерола жуманца свих група је различит и може се очигледно смањити (п<0,05) након додавања 150 и 200 мг/кг дилудина.Релативна тежина жуманца се разликује једна од друге због различитих количина додатог дилудина, при чему су релативне тежине жуманца побољшане за 18,01% и 14,92% (п<0,05) када се упореде 150мг/кг и 200мг/кг са референтном групом;стога, одговарајући дилудин има ефекат подстицања синтезе жуманца.

 

Табела 3. Ефекти дилудина на квалитет јаја

Количина дилудина за додавање (мг/кг)
Квалитет јаја	0	100	150	200
Индекс облика јаја (%)
Специфична тежина јаја (г/цм3)
Релативна тежина љуске јајета (%)
Дебљина љуске јајета (мм)
Хаугх јединица (У)
Индекс жуманца (%)
Холестерол жуманца (%)
Релативна тежина жуманца (%)

 

2.3 Утицај на проценат трбушне масти и садржај масти у јетри кокошака носиља

Видети слику 1 и слику 2 за ефекте дилудина на проценат абдоминалне масти и садржај масти у јетри кокошака носиља

 

 

 

Слика 1. Утицај дилудина на проценат абдоминалне масти (ПАФ) кокошака носиља

 

	Проценат абдоминалне масти
	Количина дилудина која треба додати

 

 

Слика 2. Утицај дилудина на садржај масти у јетри (ЛФ) кокошака носиља

	Садржај масти у јетри
	Количина дилудина која треба додати

Гледано са слике 1, проценти абдоминалне масти у тест групи су смањени за 8,3% и 12,11% (п<0,05) респективно када се 100 и 150 мг/кг дилудина упореди са референтном групом, а проценат абдоминалне масти је смањен за 33,49% (п<0,01) када се дода 200 мг/кг дилудина.Гледано са слике 2, садржај масти у јетри (апсолутно сув) обрађен са 100, 150, 200 мг/кг дилудина респективно је смањен за 15,00% (п<0,05), 15,62% (п<0,05) и 27,7% (п< 0,01) у поређењу са референтном групом;стога, дилудин има ефекат смањења процента трбушне масти и садржаја масти у јетри у садржају несања очигледно, при чему је ефекат оптималан када се дода 200 мг/кг дилудина.

2.4 Утицај на биохемијски индекс у серуму

Гледано из табеле 4, разлика између делова обрађених током фазе И (30д) СОД теста није очигледна, а серумски биохемијски индекси свих група којима је додат дилудин у фази ИИ (80д) теста су виши. него референтна група (п<0,05).Мокраћна киселина (п<0,05) у серуму се може смањити када се додају 150 мг/кг и 200 мг/кг дилудина;док је ефекат (п<0,05) доступан када се дода 100мг/кг дилудина у фази И. Дилудин може да смањи триглицериде у серуму, при чему је ефекат оптималан (п<0,01) у групи када је 150мг/кг дилудина. дилудин се додаје у фази И, а оптималан је у групи када се дода 200 мг/кг дилудина у фази ИИ.Укупни холестерол у серуму се смањује са повећањем дилудина који се додаје у дневну исхрану, тачније садржај укупног холестерола у серуму се смањује за 36,36% (п<0,01) и 40,74% (п<0,01) када 150мг/кг и 200 мг/кг дилудина се додају у фази И у поређењу са референтном групом и смањују се за 26,60% (п<0,01), 37,40% (п<0,01) и 46,66% (п<0,01) респективно када су 100мг/кг, 150мг /кг и 200 мг/кг дилудина се додају у фази ИИ у поређењу са референтном групом.Штавише, АЛП се повећава са повећањем дилудина који се додаје у дневну исхрану, док су вредности АЛП у групи којој се додаје 150 мг/кг и 200 мг/кг дилудина очигледно веће од референтне групе (п<0,05).

Табела 4. Ефекти дилудина на параметре серума

Количина дилудина која се додаје (мг/кг) у фази И (30д) теста
Ставка	0	100	150	200
Супероксид дисмутаза (мг/мЛ)
Мокраћне киселине
Триглицериди (ммол/Л)
Липаза (У/Л)
Холестерол (мг/дЛ)
Глутаминско-пирувична трансаминаза (У/Л)
Глутамин-оксалацетна трансаминаза (У/Л)
Алкална фосфатаза (ммол/Л)
Калцијум јон (ммол/Л)
Неоргански фосфор (мг/дЛ)

 

Количина дилудина која се додаје (мг/кг) у фази ИИ (80д) теста
Ставка	0	100	150	200
Супероксид дисмутаза (мг/мЛ)
Мокраћне киселине
Триглицериди (ммол/Л)
Липаза (У/Л)
Холестерол (мг/дЛ)
Глутаминско-пирувична трансаминаза (У/Л)
Глутамин-оксалацетна трансаминаза (У/Л)
Алкална фосфатаза (ммол/Л)
Калцијум јон (ммол/Л)
Неоргански фосфор (мг/дЛ)

 

3 Анализа и дискусија

3.1 Дилудин у тесту је побољшао брзину полагања, тежину јајета, Хаугхову јединицу и релативну тежину жуманца, што је показало да је дилудин имао ефекте промовисања асимилације протеина и побољшања количине синтезе густог беланчевина беланаца и протеина жуманца.Даље, садржај мокраћне киселине у серуму је очигледно смањен;и опште је прихваћено да смањење садржаја непротеинског азота у серуму значи да је смањена брзина катаболизма протеина, а време задржавања азота је одложено.Овај резултат је дао основу за повећање задржавања протеина, промовисање полагања јаја и побољшање тежине јаја кокошака носиља.Резултат теста је показао да је ефекат полагања оптималан када се дода 150мг/кг дилудина, што је у суштини било у складу са резултатом^[6,7]Бао Еркинга и Ћин Шангжија и добија се додавањем дилудина у касном периоду кокошака носиља.Ефекат је смањен када је количина дилудина прелазила 150 мг/кг, што може бити због трансформације протеина^[8]био погођен због превеликог дозирања и прекомерног оптерећења метаболизма органа на дилудин.

3.2 Концентрација Ца²⁺у серуму јајета несилица је смањен, П у серуму је у почетку смањен и активност АЛП је очигледно повећана у присуству дилудина, што указује да дилудин очигледно утиче на метаболизам Ца и П.Иуе Венбин је известио да би дилудин могао да подстакне апсорпцију^[9] минералних елемената Фе и Зн;АЛП је углавном постојао у ткивима, као што су јетра, кост, цревни тракт, бубрези, итд.;АЛП у серуму је углавном из јетре и костију;АЛП у кости је углавном постојао у остеобласту и могао је да комбинује фосфатни јон са Ца2 из серума након трансформације промовишући разградњу фосфата и повећавајући концентрацију фосфатног јона, а депоновао се на кости у облику хидроксиапатита итд. како би се дошло до смањења Ца и П у серуму, што је у складу са повећањем дебљине љуске јајета и релативне тежине љуске јајета у показатељима квалитета јајета.Штавише, стопа поломљених јаја и проценат абнормалног јаја су очигледно смањени у смислу перформанси полагања, што је такође објаснило ову тачку.

3.3 Депозиција абдоминалне масти и садржај масти у јетри код кокошака носиља су очигледно смањени додавањем дилудина у исхрану, што указује да је дилудин имао ефекат ограничавања синтезе масти у телу.Даље, дилудин би могао да побољша активност липазе у серуму у раној фази;активност липазе је очигледно повећана у групи којој је додато 100мг/кг дилудина, а садржај триглицерида и холестерола у серуму је смањен (п<0,01), што указује да дилудин може да подстакне разградњу триглицерида. и ограничавају синтезу холестерола.Таложење масти могло би бити обуздано због ензима метаболизма липида у јетри^[10,11], а смањење холестерола у жуманцету је такође објаснило ову тачку [13].Цхен Јуфанг је известио да дилудин може да спречи стварање масти код животиња и да побољша проценат немасног меса бројлера и свиња, и да је имао ефекат лечења масне јетре.Резултат теста је разјаснио овај механизам деловања, а резултати дисекције и посматрања тест кокошака су такође доказали да дилудин очигледно може да смањи стопу појаве масне јетре кокошака носиља.

3.4 ГПТ и ГОТ су два важна индикатора који одражавају функције јетре и срца, а јетра и срце могу бити оштећени ако су њихове активности превисоке.Активности ГПТ и ГОТ у серуму нису се очигледно промениле када је у тест додат дилудин, што је указивало да јетра и срце нису оштећени;даље, резултат мерења СОД је показао да се активност СОД у серуму може очигледно побољшати када се дилудин користи одређено време.СОД се односи на главни чистач супероксидних слободних радикала у телу;од значаја је за одржавање интегритета биолошке мембране, побољшање имунитета организма и очување здравља животиње када је повећан садржај СОД у организму.Кух Хаи, итд. су известили да дилудин може побољшати активност 6-глукоза фосфат дехидрогеназе у биолошкој мембрани и стабилизовати ткива [2] биолошке ћелије.Сниедзе је истакао да дилудин обуздава активност [4] НАДПХ цитохром Ц редуктазе очигледно након проучавања односа између дилудина и релевантног ензима у НАДПХ специфичном ланцу преноса електрона у микрозому јетре пацова.Одидентс је такође истакао да је дилудин повезан [4] са композитним оксидазним системом и микрозомалним ензимом повезаним са НАДПХ;а механизам деловања дилудина након уласка у животињу је да игра улогу одупирања оксидацији и заштите биолошке мембране [8] тако што пресреће активност НАДПХ ензима за пренос електрона микрозома и обуздава процес пероксидације липидног једињења.Резултат испитивања је доказао заштитну функцију дилудина на биолошкој мембрани од промене активности СОД до промене активности ГПТ и ГОТ и доказао резултате студије Сниедзеа и Одидента.

 

Референце

1 Зхоу Каи, Зхоу Мингјие, Кин Зхонгзхи, итд. Студија о дилудину побољшања репродуктивних перформанси овацаJ. Трава иLивестоцk 1994 (2): 16-17

2 Ку Хаи, Лв Ие, Ванг Баосхенг, Ефекат дилудина који се додаје дневној исхрани на стопу трудноће и квалитет сперме меса кунића.Ј. Кинески часопис о узгоју зечева1994(6): 6-7

3 Цхен Јуфанг, Иин Иуејин, Лиу Ванхан, итд. Тест проширене примене дилудина као адитива за хрануФеед Ресеарцх1993 (3): 2-4

4 Зхенг Ксиаозхонг, Ли Келу, Иуе Венбин, итд. Дискусија о ефекту примене и механизму деловања дилудина као промотера раста живинеФеед Ресеарцх1995 (7): 12-13

5 Цхен Јуфанг, Иин Иуејин, Лиу Ванхан, итд. Тест проширене примене дилудина као адитива за хрануФеед Ресеарцх1993 (3): 2-5

6 Бао Еркинг, Гао Баохуа, Тест дилудина за исхрану расе пекиншке паткеФеед Ресеарцх1992 (7): 7-8

7 Кин Схангзхи Тест побољшања продуктивности расних кокошака у касном периоду несности употребом дилудинаГуангки Јоурнал оф Анимал Хусбандри & Ветеринари Медицине1993.9(2): 26-27

8 Дибнер Ј Јл Лвеи ФЈ Хепатични протеини и метаболизам аминокиселина у живини Поултри Сци1990.69(7): 1188-1194

9 Иуе Венбин, Зханг Јианхонг, Зхао Пеие, итд. Студија додавања препарата дилудина и Фе-Зн у дневну исхрану кокошака носиљаХрана и стока1997, 18(7): 29-30

10 Милднер А на М, Стевен Д Цларке Клонирање комплементарне ДНК синтазом свињске масне киселине, дистрибуција њене иРНК у ткиву и супресија експресије соматотропином и протеином у исхрани Ј Нутри 1991, 121 900

11 В алзон РЛ Смон Ц, М орисхита Т, ет а И Хеморагични синдром масне јетре код кокошака које су прекомерно храњене пречишћеном исхраном Одабране активности ензима и хистологија јетре у односу на оштећење јетре и репродуктивне перформансеПоултри Сци,1993 72(8): 1479-1491

12 Доналдсон ВЕ Метаболизам липида у одговору јетре пилића на храњењеПоултри Сци.1990, 69(7): 1183-1187

13 Ксиазк иеу ицз Ј. К онтецка Х, Х огцв ск и Л Напомена о холестеролу у крви као индикатору телесне масноће код патака.Јоурнал оф Анинал анд Феед Сциенце,1992, 1(3/4): 289-294