С разширяването на мащаба на културата и увеличаването на гъстотата на културата, болестта на Apostichopus japonicus става все по-значима, което донесе сериозни загуби на индустрията на аквакултурите.Болестите на Apostichopus japonicus се причиняват главно от бактерии, вируси и реснички, сред които най-сериозен е синдромът на кожно гниене, причинен от Vibrio brilliant.С влошаване на заболяването стената на тялото на Apostichopus japonicus образува язви, образувайки сини и бели петна и накрая се разтваря до смърт, разтваряйки се в носна слуз като колоид.В традиционната профилактика и лечение на заболявания антибиотиците се използват широко.Но дългосрочната употреба на антибиотици не само крие скрита опасност от бактериална резистентност и остатъци от лекарства, но също така води до безопасност на храните и замърсяване на околната среда.Следователно, разработването на незамърсяващ, без остатъци, безопасен препарат за намаляване на болестта по морската краставица е една от горещите точки на настоящите изследвания.

Калиевият диформат е бял кристален насипен прах, сух и без вкус.Това е първата неантибиотична фуражна добавка, одобрена от Европейския съюз, която замества антибиотиците.Може да насърчи растежа на култивирани животни, да инхибира растежа на вредни бактерии и да подобри чревната среда. Калиевият диформат може значително да подобри растежа и добива на водни организми.

1 Резултати от теста

1.1 Ефекти на хранителния калиев диформат върху растежа и оцеляването на морската краставица Apostichopus japonicus

Специфичната скорост на растеж на Apostichopus japonicus се увеличава значително с увеличаването на съдържанието на диетичен калиев диформат.Когато диетичното съдържание на калиев диформат достигна 0,8%, т.е. когато диетичното съдържание на калиев диформат беше 1,0% и 1,2%, специфичната скорост на растеж на Apostichopus japonicus беше значително по-висока от тази на други лечения, но нямаше значителна разлика (P > 0,05) (таблица 2-2).Процентът на оцеляване на морската краставица е 100% във всички групи.

1.2 Ефекти на хранителния калиев диформат върху имунните показатели на морска краставица Apostichopus japonicus

В сравнение с контролната група, различните нива на калиев дикарбоксилат могат да подобрят фагоцитния капацитет на целомоцитите и производството на O2 – в различна степен (таблица 2-3).Когато се добави калиев диформат при 1,0% и 1,2%, фагоцитната активност на целомоцитите и производството на реактивни кислородни видове O2 – в морската краставица са значително по-високи от тези в контролната група, но няма значителни разлики между 1% и 1,2% групи с калиев диформат или между други нива на калиев диформат и контролната група.С увеличаването на съдържанието на калиев дикарбоксилат във фуража, SOD и NOS на морската краставица се увеличават.

1.3 Ефект на хранителния калиев диформат върху устойчивостта на морската краставица към инфекция с Vibrio brilliant

1,4 дни след заразяване, кумулативната смъртност на морска краставица в контролната група е 46,67%, което е значително по-високо от това в групите с 0,4%, 0,6%, 0,8%, 1,0% и 1,2% калиев диформат (26,67%, 26,67%, 30 %, 30% и 23,33%), но няма значителна разлика с групата на лечение с 0,2% (38,33%).Смъртността на морската краставица в групите с 0,4%, 0,6%, 0,8%, 1,0% и 1,2% калиев диформат няма значителна разлика.

2. Дискусия

2.1 Ефект на калиев дикарбоксилат върху растежа на морска краставица Apostichopus japonicus

При животните механизмът на действие на калиевия дикарбоксилат е главно да навлезе в стомашно-чревния тракт, да подобри стомашно-чревната среда, да регулира pH и да убие вредните бактерии (Ramli and sunanto, 2005).В допълнение, калиевият диформат може също така да насърчи усвояването на хранителните вещества във фуража и да подобри смилаемостта и степента на използване на култивираните животни.При прилагането на водни животни експериментите показват, че калиевият диформат може значително да подобри растежа и степента на оцеляване на скаридите (he Suxu, Zhou Zhigang, et al., 2006).В това проучване растежът на морската краставица (Apostichopus japonicus) е стимулиран чрез добавяне на калиев дикарбоксилат към храната, което е в съответствие с резултатите от приложението на калиев дикарбоксилат при прасенца и прасета за добив, докладвани от verland.М (2000).

2.2 Ефект на калиев дикарбоксилат върху имунитета на морска краставица Apostichopus japonicus

Apostichopus japonicus има същия защитен механизъм като другите бодлокожи, който се допълва от клетъчен и неклетъчен (хуморален) имунен отговор.Използва се главно за идентифициране и елиминиране на чужди тела, влизащи в тялото на животното, или превръщане на чужди тела в безвредни вещества и възстановяване на рани.Клетъчният имунен отговор на бодлокожите се допълва от различни целомоцити, които образуват защитната система на бодлокожите.Основните функции на тези клетки включват фагоцитоза, реакция на цитотоксини и производство на антибактериални вещества на ниво коагулация (kudriavtsev, 2000).В процеса на фагоцитоза, целомоцитите могат да бъдат индуцирани от бактерии или компоненти на бактериална клетъчна стена, за да произвеждат реактивни кислородни видове (ROS), включително no, H2O2, oh и O2 -.В този експеримент добавянето на 1,0% и 1,2% калиев дикарбоксилат към диетата значително повишава фагоцитната активност на целомоцитите и производството на реактивни кислородни видове.Въпреки това, механизмът на калиевия диформат, повишаващ фагоцитната активност и производството на O2, трябва да бъде допълнително проучен.

2.3 Ефект на калиев дикарбоксилат върху чревната флора на морска краставица Apostichopus japonicus

Калиевият дикарбоксилат може да се разложи на мравчена киселина и формиат в слаба алкална среда и да влезе в микробните клетки през клетъчната мембрана.Той може да промени жизнената среда на вредни микроорганизми като Escherichia coli и Salmonella, като промени стойността на pH вътре в клетките и предотврати тяхното размножаване, така че да регулира чревния микроекологичен баланс (eidelsburger, 1998).Ефектът на калиевия дикарбоксилат върху чревната микрофлора, макроскопски, H +, произведен от разлагането на калиев дикарбоксилат, намалява стойността на рН в червата и инхибира растежа на чревната микрофлора.Микроскопски Н + навлиза в бактериалните клетки през клетъчната мембрана, директно унищожава активността на вътреклетъчните ензими, засяга метаболизма на микробния протеин и нуклеиновата киселина и играе роля в стерилизацията (Roth, 1998).Резултатите показват, че калиевият диформат има малък ефект върху общите чревни бактерии на морската краставица, но може значително да инхибира броя на Vibrio.

2.4 Ефект на калиев дикарбоксилат върху устойчивостта на морска краставица Apostichopus japonicus към болести

Vibrio splendens е патогенната бактерия на синдрома на гниене на кожата на морската краставица, която е вредна за производството и отглеждането на морска краставица.Този експеримент доказа, че добавянето на калиев дикарбоксилат към храната намалява смъртността на морската краставица, заразена с Vibrio brilliant.Това може да е свързано с инхибиращия ефект на калиев диформат върху Vibrio.

3 Заключение

Резултатите показват, че диетичният калиев диформат има значителен ефект върху растежа на Apostichopus japonicus, има положителен ефект върху неспецифичния имунитет на Apostichopus japonicus и повишава хуморалния и клетъчния имунитет на Apostichopus japonicus.Добавянето на калиев дикарбоксилат в диетата значително намалява броя на вредните бактерии в червата на морската краставица и повишава устойчивостта на болестта на морската краставица, заразена с Vibrio brilliant.В заключение, калиевият дикарбоксилат може да се използва като подобрител на имунната система в храните с морски краставици и подходящата доза калиев дикарбоксилат е 1,0%.