S rozširovaním rozsahu kultúr a zvyšovaním hustoty kultúr sa choroba Apostichopus japonicus stáva čoraz významnejšou, čo prinieslo vážne straty pre odvetvie akvakultúry.Ochorenia Apostichopus japonicus spôsobujú najmä baktérie, vírusy a nálevníky, z ktorých najzávažnejší je syndróm hniloby kože spôsobený Vibrio brilantným.So zhoršovaním choroby sa telesná stena vredov Apostichopus japonicus, tvoriacich modré a biele škvrny, a nakoniec sa sama rozpúšťa na smrť, rozpúšťa sa do nosného hlienu ako koloid.V tradičnej prevencii a liečbe chorôb sa široko používajú antibiotiká.Ale dlhodobé užívanie antibiotík má nielen skryté nebezpečenstvo bakteriálnej rezistencie a zvyškov liekov, ale prináša aj bezpečnosť potravín a znečistenie životného prostredia.Preto je vývoj neznečisťujúceho, bezzvyškového a bezpečného prípravku na zníženie choroby morských uhoriek jedným z horúcich miest súčasného výskumu.

Mravčan draselný je biely kryštalický sypký prášok, suchý a bez chuti.Je to prvá neantibiotická kŕmna doplnková látka schválená Európskou úniou, ktorá nahrádza antibiotiká.Môže podporiť rast kultivovaných zvierat, inhibovať rast škodlivých baktérií a zlepšiť črevné prostredie, dimravčan draselný môže výrazne zlepšiť rast a výnos vodných organizmov.

1 Výsledky testu

1.1 Účinky dimravčanu draselného v potrave na rast a prežitie morskej uhorky Apostichopus japonicus

Špecifická rýchlosť rastu Apostichopus japonicus sa výrazne zvýšila so zvýšením obsahu dimravčanu draselného v strave.Keď obsah dimravčanu draselného v potrave dosiahol 0,8 %, to znamená, keď obsah dimravčanu draselného v potrave bol 1,0 % a 1,2 %, špecifická rýchlosť rastu Apostichopus japonicus bola výrazne vyššia ako pri iných liečebných postupoch, ale nebol tam žiadny významný rozdiel (P > 0,05) (tabuľka 2-2).Miera prežitia morských uhoriek bola 100 % vo všetkých skupinách.

1.2 Účinky dimravčanu draselného v potrave na imunitný index morskej uhorky Apostichopus japonicus

V porovnaní s kontrolnou skupinou mohli rôzne hladiny dikarboxylátu draselného zlepšiť fagocytárnu kapacitu coelomocytov a produkciu O2 – v rôznych stupňoch (tabuľka 2-3).Keď sa pridal mravčan draselný v koncentrácii 1,0 % a 1,2 %, fagocytárna aktivita coelomocytov a produkcia reaktívnych foriem kyslíka O2 – v morskej uhorke boli výrazne vyššie ako v kontrolnej skupine, ale neboli žiadne významné rozdiely medzi 1 % a skupiny s 1,2 % dimravčanom draselným alebo medzi inými hladinami dimravčanu draselného a kontrolnou skupinou.So zvýšením obsahu dikarboxylátu draselného v krmive sa zvýšili SOD a NOS morských uhoriek.

1.3 Vplyv dietetického dimravčanu draselného na odolnosť morskej uhorky voči infekcii Vibrio brilant

1,4 dňa po stimulácii bola kumulatívna úmrtnosť morských uhoriek v kontrolnej skupine 46,67 %, čo bolo významne vyššie ako v skupinách s 0,4 %, 0,6 %, 0,8 %, 1,0 % a 1,2 % mravčanom draselným (26,67 %, 26,67 %, 30 % %, 30 % a 23,33 %), ale v skupine liečenej 0,2 % (38,33 %) nebol významný rozdiel.Úmrtnosť morských uhoriek v skupinách s 0,4%, 0,6%, 0,8%, 1,0% a 1,2% dvojmravčanom draselným nemala žiadny významný rozdiel.

2. Diskusia

2.1 Účinok dikarboxylátu draselného na rast morskej uhorky Apostichopus japonicus

Mechanizmus účinku dikarboxylátu draselného u zvierat spočíva najmä vo vstupe do gastrointestinálneho traktu, zlepšení gastrointestinálneho prostredia, regulácii pH a zabíjaní škodlivých baktérií (Ramli a sunanto, 2005).Okrem toho môže mravčan draselný tiež podporovať vstrebávanie živín v krmive a zlepšovať stráviteľnosť a mieru využitia chovaných zvierat.Pri aplikácii na vodné živočíchy experimenty ukázali, že dimravčan draselný môže výrazne zlepšiť rast a mieru prežitia kreviet (he Suxu, Zhou Zhigang, et al., 2006).V tejto štúdii bol rast morskej uhorky (Apostichopus japonicus) podporovaný pridaním dikarboxylátu draselného do krmiva, čo bolo v súlade s výsledkami aplikácie dikarboxylátu draselného u prasiatok a ošípaných, ktoré uvádza verland.M (2000).

2.2 Vplyv dikarboxylátu draselného na imunitu morskej uhorky Apostichopus japonicus

Apostichopus japonicus má rovnaký obranný mechanizmus ako ostatné ostnatokožce, ktorý je doplnený bunkovou a nebunkovou (humorálnou) imunitnou odpoveďou.Používa sa hlavne na identifikáciu a elimináciu cudzích telies vstupujúcich do tela zvieraťa alebo na premenu cudzích telies na neškodné látky a na opravu rán.Bunkovú imunitnú odpoveď ostnokožcov dopĺňajú rôzne coelomocyty, ktoré tvoria obranný systém ostnokožcov.Medzi hlavné funkcie týchto buniek patrí fagocytóza, cytotoxínová reakcia a produkcia antibakteriálnych látok na úrovni koagulácie (kudriavtsev, 2000).V procese fagocytózy môžu byť coelomocyty indukované baktériami alebo zložkami bakteriálnej bunkovej steny, aby produkovali reaktívne formy kyslíka (ROS), vrátane no, H2O2, oh a O2 -.V tomto experimente pridanie 1,0 % a 1,2 % dikarboxylátu draselného do stravy významne zvýšilo fagocytárnu aktivitu coelomocytov a produkciu reaktívnych foriem kyslíka.Mechanizmus dimravčanu draselného zvyšujúceho fagocytárnu aktivitu a produkciu O2 je však potrebné ďalej študovať.

2.3 Účinok dikarboxylátu draselného na črevnú flóru morskej uhorky Apostichopus japonicus

Dikarboxylát draselný sa môže v slabo alkalickom prostredí rozložiť na kyselinu mravčiu a mravčan a cez bunkovú membránu vstúpiť do mikrobiálnych buniek.Dokáže zmeniť životné prostredie škodlivých mikroorganizmov, ako sú Escherichia coli a Salmonella, zmenou hodnoty pH vo vnútri buniek a zabránením ich rozmnožovaniu tak, aby sa regulovala črevná mikroekologická rovnováha (eidelsburger, 1998).Vplyv dikarboxylátu draselného na črevnú mikroflóru, makroskopicky H+ produkovaný rozkladom dikarboxylátu draselného znižuje hodnotu pH v čreve a inhibuje rast črevnej mikroflóry.Mikroskopicky H+ vstupuje do bakteriálnych buniek cez bunkovú membránu, priamo ničí aktivitu vnútrobunkových enzýmov, ovplyvňuje metabolizmus mikrobiálneho proteínu a nukleovej kyseliny a hrá úlohu pri sterilizácii (Roth, 1998).Výsledky ukázali, že dimravčan draselný mal malý vplyv na celkové črevné baktérie morskej uhorky, ale mohol výrazne inhibovať počet Vibrio.

2.4 Účinok dikarboxylátu draselného na odolnosť morskej uhorky voči chorobám Apostichopus japonicus

Vibrio splendens je patogénna baktéria syndrómu hniloby kože morskej uhorky, ktorá je škodlivá pre produkciu a pestovanie uhoriek.Tento experiment dokázal, že pridanie dikarboxylátu draselného do krmiva znížilo úmrtnosť morských uhoriek infikovaných Vibrio brilantným.Môže to súvisieť s inhibičným účinkom dimravčanu draselného na Vibrio.

3 Záver

Výsledky ukázali, že dimravčan draselný z potravy mal významný vplyv na rast Apostichopus japonicus, mal pozitívny vplyv na nešpecifickú imunitu Apostichopus japonicus a posilnil humorálnu a bunkovú imunitu Apostichopus japonicus.Pridanie dikarboxylátu draselného do stravy výrazne znížilo počet škodlivých baktérií v črevách morskej uhorky a zvýšilo odolnosť morskej uhorky infikovanej Vibrio briliant voči chorobám.Záverom možno povedať, že dikarboxylát draselný sa môže použiť ako posilňovač imunity v krmive pre morské uhorky a vhodná dávka dikarboxylátu draselného je 1,0%.