Com a expansão da escala cultural e o aumento da densidade cultural, a doença de Apostichopus japonicus tornou-se cada vez mais significativa, o que trouxe sérios prejuízos à indústria da aquicultura.As doenças do Apostichopus japonicus são causadas principalmente por bactérias, vírus e ciliados, dentre os quais a síndrome da podridão cutânea causada pelo Vibrio brilhante é a mais grave.Com o agravamento da doença, a parede corporal do Apostichopus japonicus ulcera, formando manchas azuis e brancas, e finalmente se dissolve até a morte, dissolvendo-se em muco nasal como colóide.Na prevenção e tratamento tradicional de doenças, os antibióticos são amplamente utilizados.Mas o uso prolongado de antibióticos não só traz o perigo oculto de resistência bacteriana e resíduos de medicamentos, mas também traz segurança alimentar e poluição ambiental.Portanto, o desenvolvimento de uma preparação não poluente, não residual e segura para reduzir a doença do pepino do mar é um dos pontos quentes da pesquisa atual.

O diformato de potássio é um pó solto cristalino branco, seco e insípido.É o primeiro aditivo alimentar não antibiótico aprovado pela União Europeia para substituir os antibióticos.Pode promover o crescimento de animais cultivados, inibir o crescimento de bactérias nocivas e melhorar o ambiente intestinal. O diformato de potássio pode melhorar significativamente o crescimento e o rendimento de organismos aquáticos.

1 Resultados do teste

1.1 Efeitos do diformato de potássio na dieta sobre o crescimento e sobrevivência do pepino-do-mar Apostichopus japonicus

A taxa de crescimento específico de Apostichopus japonicus aumentou significativamente com o aumento do teor de diformato de potássio na dieta.Quando o teor de diformato de potássio na dieta atingiu 0,8%, ou seja, quando o teor de diformato de potássio na dieta foi de 1,0% e 1,2%, a taxa de crescimento específico de Apostichopus japonicus foi significativamente maior do que a de outros tratamentos, mas não houve diferença significativa (P > 0,05) (tabela 2-2).A taxa de sobrevivência do pepino-do-mar foi de 100% em todos os grupos.

1.2 Efeitos do diformato de potássio na dieta sobre os índices imunológicos do pepino-do-mar Apostichopus japonicus

Em comparação com o grupo de controlo, diferentes níveis de dicarboxilato de potássio poderiam melhorar a capacidade fagocítica dos celomócitos e a produção de O2 – em diferentes graus (tabela 2-3).Quando o diformato de potássio foi adicionado a 1,0% e 1,2%, a atividade fagocítica dos celomócitos e a produção de espécies reativas de oxigênio O2 – no pepino do mar foram significativamente maiores do que aquelas no grupo controle, mas não houve diferenças significativas entre os 1% e Grupos de diformato de potássio a 1,2%, ou entre outros níveis de diformato de potássio e o grupo controle.Com o aumento do teor de dicarboxilato de potássio na ração, a SOD e a NOS do pepino-do-mar aumentaram.

1.3 Efeito do diformato de potássio na dieta sobre a resistência do pepino-do-mar à infecção por Vibrio brilhante

1,4 Dias após o desafio, a mortalidade cumulativa de pepinos do mar no grupo de controle foi de 46,67%, o que foi significativamente maior do que nos grupos de diformato de potássio de 0,4%, 0,6%, 0,8%, 1,0% e 1,2% (26,67%, 26,67%, 30 %, 30% e 23,33%), mas não houve diferença significativa com o grupo de tratamento de 0,2% (38,33%).A mortalidade do pepino do mar nos grupos de diformato de potássio de 0,4%, 0,6%, 0,8%, 1,0% e 1,2% não teve diferença significativa.

2. Discussão

2.1 Efeito do dicarboxilato de potássio no crescimento do pepino-do-mar Apostichopus japonicus

Em animais, o mecanismo de ação do dicarboxilato de potássio é principalmente entrar no trato gastrointestinal, melhorar o ambiente gastrointestinal, regular o pH e matar bactérias nocivas (Ramli e sunanto, 2005).Além disso, o diformato de potássio também pode promover a absorção de nutrientes na ração e melhorar a digestibilidade e a taxa de utilização dos animais cultivados.Na aplicação de animais aquáticos, experimentos mostraram que o diformato de potássio pode melhorar significativamente o crescimento e a taxa de sobrevivência dos camarões (he Suxu, Zhou Zhigang, et al., 2006).Neste estudo, o crescimento do pepino-do-mar (Apostichopus japonicus) foi promovido pela adição de dicarboxilato de potássio à ração, o que foi consistente com os resultados da aplicação de dicarboxilato de potássio em leitões e porcos em terminação relatados por Verland.M (2000).

2.2 Efeito do dicarboxilato de potássio na imunidade do pepino-do-mar Apostichopus japonicus

Apostichopus japonicus possui o mesmo mecanismo de defesa de outros equinodermos, que é completado por resposta imune celular e não celular (humoral).É usado principalmente para identificar e eliminar corpos estranhos que entram no corpo do animal, ou transformar corpos estranhos em substâncias inofensivas e reparar feridas.A resposta imune celular dos equinodermos é completada por uma variedade de celomócitos, que formam o sistema de defesa dos equinodermos.As principais funções dessas células incluem a fagocitose, a reação de citotoxinas e a produção de substâncias antibacterianas no nível da coagulação (kudriavtsev, 2000).No processo de fagocitose, os celomócitos podem ser induzidos por bactérias ou componentes da parede celular bacteriana a produzir espécies reativas de oxigênio (ROS), incluindo não, H2O2, oh e O2 -.Neste experimento, a adição de 1,0% e 1,2% de dicarboxilato de potássio à dieta aumentou significativamente a atividade fagocítica dos celomócitos e a produção de espécies reativas de oxigênio.No entanto, o mecanismo do diformato de potássio aumentando a atividade fagocítica e a produção de O2 precisa ser mais estudado.

2.3 Efeito do dicarboxilato de potássio na flora intestinal do pepino-do-mar Apostichopus japonicus

O dicarboxilato de potássio pode ser decomposto em ácido fórmico e formato no ambiente alcalino fraco e entrar nas células microbianas através da membrana celular.Pode alterar o ambiente de vida de microrganismos nocivos como Escherichia coli e Salmonella, alterando o valor do pH no interior das células e impedindo a sua reprodução, de modo a regular o equilíbrio microecológico intestinal (eidelsburger, 1998).O efeito do dicarboxilato de potássio na microflora intestinal, macroscopicamente, o H + produzido pela decomposição do dicarboxilato de potássio reduz o valor do pH no intestino e inibe o crescimento da microflora intestinal.Microscopicamente, o H + entra nas células bacterianas através da membrana celular, destrói diretamente a atividade das enzimas intracelulares, afeta o metabolismo da proteína microbiana e do ácido nucleico e desempenha um papel na esterilização (Roth, 1998).Os resultados mostraram que o diformato de potássio teve pouco efeito sobre o total de bactérias intestinais do pepino-do-mar, mas poderia inibir significativamente o número de Vibrio.

2.4 Efeito do dicarboxilato de potássio na resistência a doenças do pepino-do-mar Apostichopus japonicus

Vibrio splendens é a bactéria patogênica da síndrome da podridão cutânea do pepino-do-mar, que é prejudicial à produção e cultivo do pepino-do-mar.Esta experiência provou que a adição de dicarboxilato de potássio na ração reduziu a mortalidade de pepinos-do-mar infectados com Vibrio brilhante.Isto pode estar relacionado ao efeito inibitório do diformato de potássio no Vibrio.

3 Conclusão

Os resultados mostraram que o diformato de potássio na dieta teve um efeito significativo no crescimento de Apostichopus japonicus, teve um efeito positivo na imunidade inespecífica de Apostichopus japonicus e aumentou a imunidade humoral e celular de Apostichopus japonicus.A adição de dicarboxilato de potássio na dieta reduziu significativamente o número de bactérias nocivas nos intestinos do pepino-do-mar e aumentou a resistência a doenças do pepino-do-mar infectado com Vibrio brilhante.Concluindo, o dicarboxilato de potássio pode ser usado como intensificador do sistema imunológico na alimentação de pepinos do mar, e a dosagem apropriada de dicarboxilato de potássio é de 1,0%.