С расширением масштабов выращивания и увеличением плотности культивирования заболевание Apostichopus japonicus приобретает все большее значение, что принесло серьезные убытки отрасли аквакультуры.Заболевания Apostichopus japonicus вызываются преимущественно бактериями, вирусами и инфузориями, среди которых наиболее опасным является синдром кожной гнили, вызываемый Vibrio блестящим.При обострении заболевания стенки тела Apostichopus japonicus изъязвляются, образуя сине-белые пятна, и, наконец, самостоятельно растворяются насмерть, растворяясь в носовой слизи наподобие коллоида.В традиционной профилактике и лечении заболеваний широко используются антибиотики.Но длительное использование антибиотиков не только таит в себе скрытую опасность бактериальной резистентности и остатков лекарств, но также приводит к безопасности пищевых продуктов и загрязнению окружающей среды.Поэтому разработка экологически чистого, не оставляющего остатков и безопасного препарата для снижения заболеваемости трепанга является одной из горячих точек текущих исследований.

Диформиат калия — белый кристаллический сыпучий порошок, сухой и безвкусный.Это первая кормовая добавка, не содержащая антибиотиков, одобренная Европейским Союзом для замены антибиотиков.Он может способствовать росту культивируемых животных, подавлять рост вредных бактерий и улучшать кишечную среду. Диформиат калия может значительно улучшить рост и урожайность водных организмов.

1 Результаты испытаний

1.1 Влияние диетического диформиата калия на рост и выживаемость трепанга Apostichopus japonicus

Удельная скорость роста Apostichopus japonicus значительно увеличивалась с увеличением содержания в рационе диформиата калия.Когда содержание диформиата калия в диете достигало 0,8%, то есть когда содержание диформиата калия в пище составляло 1,0% и 1,2%, удельная скорость роста Apostichopus japonicus была значительно выше, чем у других видов лечения, но существенной разницы не было (P >0,05) (табл. 2-2).Выживаемость трепанга во всех группах составила 100%.

1.2 Влияние диетического диформиата калия на иммунные показатели трепанга Apostichopus japonicus

По сравнению с контрольной группой разные уровни дикарбоксилата калия могли улучшить фагоцитарную способность целомоцитов и продукцию О2 – в разной степени (таблица 2-3).При добавлении диформиата калия в концентрации 1,0% и 1,2% фагоцитарная активность целомоцитов и продукция активных форм кислорода О2 – у трепанга были достоверно выше, чем в контрольной группе, однако достоверных различий между 1% и 1,2% не было. 1,2% групп диформиата калия или между другими уровнями диформиата калия и контрольной группой.С увеличением содержания дикарбоксилата калия в кормах СОД и БНО трепанга увеличивались.

1.3 Влияние диетического диформиата калия на устойчивость трепанга к вибриональной инфекции

Через 1,4 дня после заражения кумулятивная смертность трепанга в контрольной группе составила 46,67%, что было значительно выше, чем в группах с 0,4%, 0,6%, 0,8%, 1,0% и 1,2% диформиатом калия (26,67%, 26,67%, 30 %, 30% и 23,33%), но не было существенной разницы с группой лечения 0,2% (38,33%).Смертность трепанга в группах с 0,4%, 0,6%, 0,8%, 1,0% и 1,2% диформиатом калия не имела существенных различий.

2. Обсуждение

2.1 Влияние дикарбоксилата калия на рост трепанга Apostichopus japonicus

У животных механизм действия дикарбоксилата калия заключается в основном в попадании в желудочно-кишечный тракт, улучшении желудочно-кишечной среды, регулировании pH и уничтожении вредных бактерий (Ramli and Sunanto, 2005).Кроме того, диформиат калия может также способствовать усвоению питательных веществ из корма и улучшать усвояемость и степень использования выращиваемых животных.Эксперименты при применении на водных животных показали, что диформиат калия может значительно улучшить рост и выживаемость креветок (Хе Сусу, Чжоу Чжиган и др., 2006).В этом исследовании рост трепанга (Apostichopus japonicus) стимулировался добавлением в корм дикарбоксилата калия, что соответствовало результатам применения дикарбоксилата калия поросятам и свиньям на откорме, о которых сообщил Верланд.М (2000).

2.2 Влияние дикарбоксилата калия на иммунитет трепанга Apostichopus japonicus

Apostichopus japonicus обладает тем же защитным механизмом, что и другие иглокожие, который дополняется клеточным и неклеточным (гуморальным) иммунным ответом.В основном он используется для выявления и устранения инородных тел, попадающих в тело животного, или превращения инородных тел в безвредные вещества, а также для заживления ран.Клеточный иммунный ответ иглокожих завершается множеством целомоцитов, образующих защитную систему иглокожих.К основным функциям этих клеток относятся фагоцитоз, реакция цитотоксинов и продукция антибактериальных веществ на уровне коагуляции (Кудрявцев, 2000).В процессе фагоцитоза целомоциты могут быть индуцированы бактериями или компонентами бактериальной клеточной стенки для производства активных форм кислорода (АФК), включая NO, H2O2, OH и O2-.В этом эксперименте добавление в рацион 1,0% и 1,2% дикарбоксилата калия значительно повышало фагоцитарную активность целомоцитов и продукцию активных форм кислорода.Однако механизм повышения фагоцитарной активности и продукции О2 диформиатом калия нуждается в дальнейшем изучении.

2.3 Влияние дикарбоксилата калия на кишечную флору трепанга Apostichopus japonicus

Дикарбоксилат калия может разлагаться на муравьиную кислоту и формиаты в слабощелочной среде и проникать в микробные клетки через клеточную мембрану.Он может изменить среду обитания вредных микроорганизмов, таких как Escherichia coli и Salmonella, изменяя значение pH внутри клеток и предотвращая их размножение, чтобы регулировать микроэкологический баланс кишечника (eidelsburger, 1998).Влияние дикарбоксилата калия на микрофлору кишечника: макроскопически Н+, образующийся при разложении дикарбоксилата калия, снижает значение рН в кишечнике и угнетает рост кишечной микрофлоры.Микроскопически Н+ проникает в бактериальные клетки через клеточную мембрану, непосредственно разрушает активность внутриклеточных ферментов, влияет на метаболизм микробного белка и нуклеиновой кислоты, играет роль в стерилизации (Roth, 1998).Результаты показали, что диформиат калия мало влиял на общее количество кишечных бактерий трепанга, но мог значительно подавлять количество вибрионов.

2.4 Влияние дикарбоксилата калия на устойчивость трепанга Apostichopus japonicus к болезням

Vibrio splendens – это патогенные бактерии синдрома кожной гнили трепанга, которые вредны для производства и выращивания трепанга.Этот эксперимент доказал, что добавление дикарбоксилата калия в корм снижает смертность трепанга, зараженного вибрионом блестящим.Это может быть связано с ингибирующим действием диформиата калия на вибрионы.

3 Заключение

Результаты показали, что диетический диформиат калия оказывал существенное влияние на рост Apostichopus japonicus, положительно влиял на неспецифический иммунитет Apostichopus japonicus и усиливал гуморальный и клеточный иммунитет Apostichopus japonicus.Добавление в рацион дикарбоксилата калия существенно снизило количество вредных бактерий в кишечнике трепанга, а также повысило устойчивость трепанга к болезням, зараженного вибрионом блестящим.В заключение, дикарбоксилат калия можно использовать в качестве усилителя иммунитета в корме для трепанга, а соответствующая дозировка дикарбоксилата калия составляет 1,0%.