Širenjem opsega kulture i povećanjem gustoće kulture, bolest Apostichopus japonicus postala je sve značajnija, što je donijelo ozbiljne gubitke industriji akvakulture.Bolesti Apostichopus japonicus uglavnom su uzrokovane bakterijama, virusima i cilijatima, među kojima je najozbiljniji sindrom truleži kože koju uzrokuje Vibrio brilliant.S pogoršanjem bolesti, tjelesna stijenka Apostichopus japonicus stvara čireve, stvarajući plave i bijele mrlje, i konačno se sama rastapa do smrti, otapajući se u nosnu sluz poput koloida.U tradicionalnoj prevenciji i liječenju bolesti naširoko se koriste antibiotici.Ali dugotrajna uporaba antibiotika ne samo da nosi skrivenu opasnost od rezistencije bakterija i ostataka lijekova, već donosi i sigurnost hrane i zagađenje okoliša.Stoga je razvoj sigurnog pripravka koji ne zagađuje okoliš, bez rezidua za smanjenje bolesti morskih krastavaca jedno od žarišta trenutnih istraživanja.

Kalijev diformat je bijeli kristalni rastresiti prah, suh i bez okusa.To je prvi neantibiotski dodatak stočnoj hrani odobren od strane Europske unije koji zamjenjuje antibiotike.Može pospješiti rast uzgojenih životinja, spriječiti rast štetnih bakterija i poboljšati crijevni okoliš. Kalijev diformat može značajno poboljšati rast i prinos vodenih organizama.

1 Rezultati testa

1.1 Učinci dijetetskog kalij diformata na rast i preživljavanje morskog krastavca Apostichopus japonicus

Specifična brzina rasta Apostichopus japonicus značajno se povećala s povećanjem udjela kalijevog diformata u prehrani.Kada je sadržaj kalijevog diformata u ishrani dosegao 0,8%, to jest, kada je sadržaj kalijevog diformata u ishrani bio 1,0% i 1,2%, specifična stopa rasta Apostichopus japonicus bila je znatno viša nego kod drugih tretmana, ali nije bilo značajne razlike (P > 0,05) (tablica 2-2).Stopa preživljavanja morskog krastavca bila je 100% u svim skupinama.

1.2 Učinci dijetetskog kalij diformata na imunološke indekse morskog krastavca Apostichopus japonicus

U usporedbi s kontrolnom skupinom, različite razine kalijevog dikarboksilata mogle su poboljšati fagocitni kapacitet kolomocita i proizvodnju O2 – u različitim stupnjevima (tablica 2-3).Kada je kalijev diformat dodan u dozi od 1,0% i 1,2%, fagocitna aktivnost kolomocita i proizvodnja reaktivnih kisikovih vrsta O2 – u morskom krastavcu bili su značajno viši od onih u kontrolnoj skupini, ali nije bilo značajnih razlika između 1% i 1,2% skupina kalijevog diformijata ili između drugih razina kalijevog diformijata i kontrolne skupine.S povećanjem sadržaja kalij dikarboksilata u hrani, SOD i NOS morskog krastavca su se povećali.

1.3 Učinak kalijevog diformata iz hrane na otpornost morskog krastavca na infekciju Vibrio brilliant

1,4 Dana nakon izlaganja, kumulativna smrtnost morskih krastavaca u kontrolnoj skupini bila je 46,67%, što je bilo značajno više od one u skupinama s 0,4%, 0,6%, 0,8%, 1,0% i 1,2% kalij diformijatom (26,67%, 26,67%, 30 %, 30% i 23,33%), ali nije bilo značajne razlike s 0,2% liječenom skupinom (38,33%).Smrtnost morskih krastavaca u skupinama s 0,4%, 0,6%, 0,8%, 1,0% i 1,2% kalij diformijatom nije imala značajne razlike.

2. Rasprava

2.1 Učinak kalijevog dikarboksilata na rast morskog krastavca Apostichopus japonicus

Kod životinja, mehanizam djelovanja kalijevog dikarboksilata uglavnom je da uđe u gastrointestinalni trakt, poboljša gastrointestinalni okoliš, regulira pH i ubije štetne bakterije (Ramli i Sunanto, 2005.).Uz to, kalijev diformat također može pospješiti apsorpciju hranjivih tvari u hrani i poboljšati probavljivost i stopu iskorištenja uzgojenih životinja.U primjeni na vodenim životinjama pokusi su pokazali da kalijev diformat može značajno poboljšati rast i stopu preživljavanja račića (he Suxu, Zhou Zhigang i sur., 2006.).U ovoj studiji, rast morskog krastavca (Apostichopus japonicus) poticao se dodavanjem kalijevog dikarboksilata hrani, što je bilo u skladu s rezultatima primjene kalijevog dikarboksilata u prasadi i završnih svinja koje je objavio Verland.M (2000).

2.2 Učinak kalijevog dikarboksilata na imunitet morskog krastavca Apostichopus japonicus

Apostichopus japonicus ima isti obrambeni mehanizam kao i ostali bodljokošci, koji je upotpunjen staničnim i nestaničnim (humoralnim) imunološkim odgovorom.Uglavnom se koristi za identifikaciju i uklanjanje stranih tijela koja ulaze u životinjsko tijelo ili za pretvaranje stranih tijela u bezopasne tvari i saniranje rana.Stanični imunološki odgovor bodljikaša upotpunjen je nizom celomocita, koji čine obrambeni sustav bodljikaša.Glavne funkcije ovih stanica uključuju fagocitozu, reakciju citotoksina i proizvodnju antibakterijskih tvari na razini koagulacije (kudriavtsev, 2000).U procesu fagocitoze, bakterije ili komponente bakterijske stanične stijenke mogu inducirati kolomocite da proizvode reaktivne kisikove vrste (ROS), uključujući no, H2O2, oh i O2 -.U ovom eksperimentu, dodavanje 1,0% i 1,2% kalij dikarboksilata u prehranu značajno je povećalo fagocitnu aktivnost kolomocita i proizvodnju reaktivnih kisikovih vrsta.Međutim, mehanizam kojim kalij diformat povećava fagocitnu aktivnost i proizvodnju O2 treba dalje proučavati.

2.3 Učinak kalijevog dikarboksilata na crijevnu floru morskog krastavca Apostichopus japonicus

Kalijev dikarboksilat se može razgraditi u mravlju kiselinu i format u slabo alkalnom okruženju i ući u mikrobne stanice kroz staničnu membranu.Može promijeniti životnu okolinu štetnih mikroorganizama kao što su Escherichia coli i Salmonella mijenjajući pH vrijednost unutar stanica i sprječavajući njihovo razmnožavanje, čime se regulira mikroekološka ravnoteža crijeva (eidelsburger, 1998).Utjecaj kalijevog dikarboksilata na crijevnu mikrofloru, makroskopski, H+ koji nastaje razgradnjom kalijevog dikarboksilata smanjuje pH vrijednost u crijevu i inhibira rast crijevne mikroflore.Mikroskopski, H+ ulazi u bakterijske stanice kroz staničnu membranu, izravno uništava aktivnost intracelularnih enzima, utječe na metabolizam mikrobnih proteina i nukleinske kiseline te igra ulogu u sterilizaciji (Roth, 1998).Rezultati su pokazali da je kalijev diformat imao mali učinak na ukupne crijevne bakterije morskog krastavca, ali je mogao značajno inhibirati broj Vibrio.

2.4 Učinak kalij dikarboksilata na otpornost morskog krastavca Apostichopus japonicus na bolesti

Vibrio splendens je patogena bakterija sindroma truleži kožice morskog krastavca, koja je štetna za proizvodnju i uzgoj morskog krastavca.Ovaj pokus dokazao je da dodavanje kalijevog dikarboksilata u hranu smanjuje smrtnost morskih krastavaca zaraženih Vibrio brilliant.To može biti povezano s inhibicijskim učinkom kalijevog diformata na Vibrio.

3 Zaključak

Rezultati su pokazali da je kalijev diformat iz hrane značajno utjecao na rast Apostichopus japonicus, pozitivno utjecao na nespecifičnu imunost Apostichopus japonicus te pojačao humoralni i stanični imunitet Apostichopus japonicus.Dodatak kalijevog dikarboksilata u ishrani značajno je smanjio broj štetnih bakterija u crijevima morskog krastavca i povećao otpornost na bolesti morskog krastavca zaraženog Vibrio brilliant.U zaključku, kalijev dikarboksilat se može koristiti kao pojačivač imuniteta u hrani za morske krastavce, a odgovarajuća doza kalijevog dikarboksilata je 1,0%.